一 研究背景
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' l1 j( ]) t5 H/ r6 T厌氧氨氧化是一种生物介导反应,在缺氧条件下,自养厌氧氨氧化细菌会以亚硝酸盐为电子受体,将铵盐转化为氮气。该反应与传统的硝化作用和反硝化作用相比,产生的污泥和温室气体量少、无需有机碳和运行成本低等特点。因此,在富氮废水处理工艺中,这种生物除氮方法具有很大的开创性和应用前景。但该体系对多种环境因子较为敏感,在一定程度上限制了厌氧氨氧化反应在工业上的直接应用。因此,研究人员尝试采用富集氨氧化细菌、生物膜或膜反应器、物理、磁化、电子和生物强化技术方法解决这些问题。也有研究人员采用添加化学物质的方法来增强厌氧氨氧化过程。
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锰具有特殊的物理化学性质,锰氧化物在海洋沉积物中扮演了重要的角色。氧化锰的去氧化反应与含氮化合物的转化、氮气的生成紧密相关。研究表明,厌氧氨氧化反应会发生在海洋底泥生态系统中,锰的氧化反应能够促进厌氧氨氧化过程。然而,在人工厌氧氨氧化反应体系中,锰的氧化反应对特异微生物群落的长期影响还未被深入研究,且污水、底泥中的Mno2对厌氧氨氧化反应和特征也是未知的。目前研究发现,不同水流中Mno2的浓度差异较大,厌氧氨氧化反应的最佳Mno2浓度范围仍需要探究。
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* Y1 I+ h3 z& f二 研究目的+ ~6 `6 H2 I. U _+ t9 n) k
( X% C4 c9 {7 x8 }: ]! n {$ X% H本研究旨在探究Mno2长期暴露对厌氧氨氧化体系中颗粒的影响,主要包括以下几个方面内容:(a)不同浓度的Mno2对氮去除效率的影响;(b)厌氧氨氧化颗粒性能的变化;(c)微生物群落结构的变化。这些信息能够评估厌氧氨氧化体系对微生物群落稳定性的影响,从而进一步提高工艺水平。! u: W) e" | t% a* A
) U0 a2 S6 G, l三 材料方法/ `1 B4 Z3 k; X9 n! N# T" b1 K
1 w" }3 ]/ D' D4 ]0 B, U污泥获取方法:厌氧氨氧化接种污泥从35±1℃固定温度下运行一年的3.5 L规格升流式厌氧污泥床(UASB)反应器中获取。( M% d U0 O7 ^: ]6 l+ x; v# h
# I! A3 R( J7 R" e9 \合成污泥组成元素:反应培养所用的合成污泥由铵盐、亚硝酸盐、无机盐溶液和微量元素组成。
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测定和分析方法:采用苯酚-次氯酸盐法、N(1萘)-乙二胺法、苯酚-二磺酸法、APHA标准方法、加热萃取方法、蒽酮法和改良酚试剂法等对其进行测定和分析。+ {9 _; x0 d% I, o. Y
- Y) k. C$ O" C7 P/ p取样和测序处理:取在反应器中运行第25、145和175天时的底泥样品,扩增16S RNA的V4区域,测序并进行微生物群落分析。: j9 m+ _# z2 x( |7 n
! L; X( C7 N( o2 L四 结果与讨论7 c8 _; Q$ y. J' n, e
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1. Mno2对厌氧氨氧化反应的作用5 Z$ z1 O+ G" P2 g3 M9 l! k
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从P0到P5阶段,流出水的PH值先降后升,且在50 mg/L Mno2时该反应体系即可达到最佳效果。- Q7 p& G3 m; f
3 v$ E$ g8 o. [3 e1 l4 R
! R, C5 c3 d S* X表1 反应器在每个阶段的氮去除性能和化学计量比率
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2.Mno2对厌氧氨氧化反应中生物颗粒特征的影响) [" _& I) X2 M) S
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厌氧氨氧化反应中Mn2+的添加能提高SAA水平。该生物反应对生物量的变化无显著影响(见下图)。! q: q9 {" M& T5 R' y' J: \+ w; H. r& m
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4 v7 @ W& u. S2 S8 V: r图1 在不同阶段,反应器中厌氧氨氧化菌的特异厌氧氨氧化活性(SAA)(图A)和生物量的变化。SS:悬浮颗粒,ASS:挥发性悬浮颗粒。
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% z3 l9 Q' f6 r& x" u% c- Q. k同时,由下图可猜测该反应产生的血红素C与Mno2的添加有关。6 F5 P7 l& q7 @
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. m4 S- c: Y6 P( d9 C! }! ]. N' q# \0 k D9 f) M# i( i( T! ~5 V( }6 S0 k
图2 反应器中厌氧氨氧化菌的血红素C含量的变化。
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长期驯化能够提高自养厌氧氨氧化细菌的适应性,Mno2的添加能使微生物产生更多的EPS,EPS的产生可能更有利于脱氮作用。高浓度Mno2使厌氧氨氧化体系有更好的沉降性能。Mno2的长期添加对沉降性能的提高有利(见下图)。3 ?1 r8 f0 U; g2 C+ P
. v4 h- _: a* G% {( S. ~
" ], h" d: Z0 I
* q# _/ t7 q9 x图3 不同阶段,MnO2的长期添加对厌氧氨氧化菌的胞外聚合物(EPS)数量(图A)和沉降速度-Vs(图B)的影响。
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PN:蛋白质,PS:多糖。
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3. 微生物群落组成和多样性$ f6 Q* a7 }: `0 \) |3 J0 }$ I
9 n, M& B4 J8 C3 }由下可知,随着Mno2的持续添加,微生物群落的多样性也持续升高。! F! o% B' c& D. K8 P! d
5 S+ ]* V5 R D8 y
) y. V H( t/ I- \* H
$ ^: w% M n c. U7 Y/ Y; ^4 D# a表2 反应器中污泥样品的细菌多样性指数。5 L- V U0 N$ \3 L) O+ Z8 B
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% L" @8 D+ h V% `' y图4 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。(A)表示从门类划分。
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; i' _$ T# B$ |. o+ H& @1 s图5 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。(C)表示从属类划分。. c" s# w& s% f* ?/ o" x0 p' m
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( ]$ w; h1 v z, a' e% J6 I( K
" x% c/ F0 f7 {6 n图6 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。* r8 X O7 L% B1 j, s6 \
) A1 Z# F, [2 e: w F" ]
(B)表示从属类划分。
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, ?$ F/ }/ b' `5 j% D. T, h本文探究了Mno2、细菌和NRR之间的关系。结果显示,浮霉菌门(Planctomycetes)与NRR呈正相关关系,表明在UASB的厌氧氨氧化反应过程中,浮霉菌门(Planctomycetes)对氮的去除起到了积极作用;另外,在该反应中,Candidatus Kuenenia数量比例与TREN值的变化一致,表明Candidatus Kuenenia 对厌氧氨氧化反体系中氮的去除至关重要。
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五 结论
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0 }" ?/ K1 c8 b7 |) O长期添加1-200 mg/L的Mno2对氮的去除起到了积极作用。NRR与理化特征(沉降速率-Vs)和生物学特征(SAA、血红素C和EPS)有相同的变化趋势。随着Mno2的持续添加,微生物的优势门、纲、属的丰富度和多样性的变化增长趋势一致。厌氧氨氧化菌(Candidatus Kuenenia)总是保持为优势属。从试验结果和经济方面来看, Mno2浓度达到50 mg/L时,该反应体系即可达到最佳效果。本文研究结果表明,Mno2在anammox体系中起重要作用,它不仅能增强该体系的运行性能,还能起催化作用。
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文章题目:Roles of Mno2 on performance, sludge characteristics and microbial community in anammox system
& O4 a) q! [' r( [7 C3 K3 X发表杂志:Science of the Total Environment; f5 Q' p6 E, M, @0 q
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